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碱解法测定组织羟脯氨酸的实验研究
被引:12
作者:
孔璐
王继峰
周子悦
高宝华
牛建昭
机构:
[1] 北京中医药大学生化教研室
来源:
关键词:
羟脯氨酸;
组织匀浆;
氢氧化钠;
D O I:
暂无
中图分类号:
R341 [];
学科分类号:
摘要:
目的 在羟脯氨酸的测定方法中,传统的酸解法存在消化时间长,6 mol/L HC1易挥发,步骤繁琐等缺点,故本文目的在于探讨操作简单的碱解法测定羟脯氨酸的可行性及影响因素。方法 将待测组织匀浆或组织碎块按1:4的比例加入2.5 mol/L氢氧化钠,12℃、0.1 kPa消化20 min,然后氯氨T氧化10 min(37℃水浴),与对二甲氨基苯甲醛反应10 min(水浴80℃)生成红色化合物,550nm 处比色。分别观察了氢氧化钠浓度、水解时间、pH值、组织干重及湿重对本实验的影响,并与酸解法作了对比。结果碱解法的适宜条件如下:组织块必须称干重、2 mol/L NaOH(终浓度)、水解时间20 min、pH值6.0-6.5。结论碱解法缩短了测定时间(全部测定用2 h),简化了操作,而且灵敏度高、重复性和一致性较好,回收率较高,可用于临床和生物医学领域。
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