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神经生物化学与分子生物学.[M].王尧;杜子威主编;.人民卫生出版社.1997,
大鼠小脑部分表达序列标签的鉴定
被引：4
作者：
李学礼
吕立夏
徐磊
杨翠香
王尧
机构：
[1] 同济大学医学院生物化学教研室,同济大学医学院生物化学教研室,同济大学医学院生物化学教研室,同济大学医学院生物化学教研室,同济大学医学院生物化学教研室上海,上海,上海,上海,上海
来源：
关键词：
转录,遗传;
杂交;
表达序列标签;
小脑;
大鼠;
D O I：
暂无
中图分类号：
R338 [神经生理学];
学科分类号：
0710 ;
071006 ;
摘要：
目的 :为了获取大鼠小脑特异表达的cDNA序列 ,筛选新的EST基因片段 ,以便进一步获取有意义的cDNA全基因。方法 :以大鼠大脑、脑干mRNA逆转录cDNA作为driver (驱动 )cDNA ,大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为tester(测试 )cDNA ,经消减杂交法 ,消除与大脑及脑干相同的cDNA ,并富集低丰度基因 ,从而获得大鼠小脑特异表达基因片段 ,以及低表达基因片段 ,克隆制备成大鼠小脑特异表达cDNA文库。结果 :共挑选出 32个阳性克隆质粒 ,测序得到 34个不同基因片段的序列。最后用反Northern杂交去除假阳性 ,筛选出 8个有意义的差异表达cDNA基因片段。同时 ,将测序结果与Genbank进行同源性比较 ,发现 13个新的EST序列 ,并申请获得基因序列号(AW2 8846 1-AW2 88474)。结论 :抑制消减杂交法是一种筛选特异表达基因的有效方法。本结果可为研究脑功能的分子机制提供有益的资料
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