TaqM an探针荧光PCR定量检测大肠埃希菌方法研究

被引：4

作者：

胡朝友 ^{[1
,2
]}

傅春玲 ^{[1
]}

陆巧荣 ^{[2
]}

张宏斌 ^{[2
]}

机构：

[1] 苏州大学

[2] 江苏省昆山市疾病预防控制中心

来源：

现代预防医学 | 2014年 / 41卷 / 06期

关键词：

大肠埃希菌; PCR; 定量检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的应用TaqMan探针实时荧光PCR技术,建立大肠埃希菌的快速定量检测方法。方法根据大肠埃希菌的ydiJ基因,设计引物和探针,并分析其特异性和灵敏性。制备大肠埃希菌的质粒DNA标准品,优化qPCR反应检测体系,建立标准曲线,并进行方法学评价。结果该方法有很好的特异性,方法线性范围10～1.0×108拷贝/μl(R2:0.990～0.999)、检测限可达到10拷贝/μl和定量下限100拷贝/μl。RT-qPCR和培养计数法所得结果具有直线相关关系,r=0.991,P<0.01。结论 RT-qPCR方法可以快速、准确、定量地检测大肠埃希菌。

引用

页码：1070 / 1073+1077 +1077

页数：5