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TH和GDNF双转基因工程细胞对多巴胺能神经元的保护作用
被引:1
作者:
张文华
吴承远
王晓民
机构:
[1] 山东大学齐鲁医院神经外科
[2] 北京大学神经科学研究所 济南
[3] 济南
来源:
关键词:
帕金森病;
多巴胺;
TH;
GDNF;
工程细胞;
D O I:
暂无
中图分类号:
R741 [神经病学];
学科分类号:
1002 ;
摘要:
目的将人的外源基因TH和GDNF共同转染SH-SY5Y细胞,建立一种可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。方法将人GDNF和TH的cDNA构建于表达载体PcDNA3.0和PcDNA3.1,形成重组真核表达载体PcDNA3.1/hGDNF、和PcDNA3.0/hTH,同时转染至SH-SY5Y细胞系,利用RT-PCR鉴定筛选出高效稳定表达阳性克隆,将此工程细胞与大鼠原代多巴胺(DA)能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察DA能神经元的数目和生长状态。结果成功建立了可同时高效稳定表达人TH和GDNF双基因的工程细胞,并且该细胞可防止DA能神经元退变死亡,有助于DA能神经元抵抗MPP+的毒性损伤。结论人TH和GDNF双转基因工程细胞对DA能神经原有防治兼顾的保护作用。、
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