共 1 条
[1]
王以光. 生物工程学报 . 1989
麦迪霉素4″酰化酶基因的克隆及在螺旋霉产生菌中的表达
被引：14
作者：
王以光
金莲舫
金文藻
张秀华
曾应
徐小敏
姚军
机构：
[1] 中国医学科学院医药生物技术研究所
来源：
关键词：
麦迪霉素4"酰化酶基因;
丙酰螺旋霉素;
异戊酰螺旋霉素;
D O I：
10.13345/j.cjb.1992.01.001
中图分类号：
学科分类号：
摘要：
从含麦迪霉素生物合成基因的初级克隆pCN6C5中,发现并分离了麦迪霉素4″酰化酶基因,与质粒载体p1J680相连,获得重组质粒p66B,在螺旋霉素产生菌中得到表达,其主要产物为4″异戊酰螺旋霉素。以p66B DNA BamHI-BamHI 2.3kb插入片段为探针,从麦迪霉素产生菌基因文库中获得了另一阳性克隆pCN10F5,Southern分子杂交确定pCN10F5 BamHI-BamHI 8.0kb为同源片段。以pWHM3及pIJ680为载体,获得重组质粒pWF5及p6F5,分子大小分别为15.2kb及13.3kb。通过DNA转化,并经分子杂交实验证明,获得含重组质粒的螺旋霉素产生菌克隆菌株。其主要产物经分离、纯化后,分析其理化性质和光谱数据,鉴定为丙酰螺旋霉素Ⅲ和Ⅱ。研究还表明,麦迪霉素基因文库中只有pCN10F5 DNA与碳霉素产生菌的4″异戊酰化酶基因同源,提示pCN6C5克隆携带的麦迪霉素4″酰化酶基因与pCN10F5的4″丙酰化酶基因及碳霉素4″异戊酰化酶基因有一定的区别。
引用
收藏
页码：1 / 14
页数：14
相关论文