逆向点杂交方法检测耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变

被引：7

作者：

王文

潘卫

戚中田

金维荣

严然

苏蓓

翁心华

陈澍

张文宏

卢洪洲

机构：

[1] 第二军医大学微生物学教研室,第二军医大学微生物学教研室,第二军医大学微生物学教研室,国家人类基因组南方研究中心,国家人类基因组南方研究中心,国家人类基因组南方研究中心,上海市华山医院传染科,上海市华山医院传染科,上海市华山医院传染科,上海市华山医院传染科上

来源：

中华结核和呼吸杂志 | 2002年 / 10期

关键词：

逆向点杂交; 分支杆菌,结核; 药物耐受性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的　建立一种灵敏、特异、快速检测结核分支杆菌耐药相关基因突变的方法 ,用于临床对利福平耐药的快速诊断。方法　将 1 4条特异性探针固定在尼龙膜上 ,通过在下游引物标记生物素的方法得到生物素标记的结核分支杆菌DNAPCR扩增产物 ,与固定在尼龙膜上的特异性探针杂交 ,杂交物通过链酶亲和素标记辣根过氧化物酶及底物 (四甲基联苯胺 )显色判定结果。将杂交结果与基因测序结果及药敏试验结果进行对比分析。结果　采用逆向点杂交法共检测 2 3株耐利福平及1 1株敏感型菌株 ,与药敏试验结果、测序结果符合率分别为 2 8/ 34和 30 / 34。所发现突变类型依次为 :第 531位突变 1 1株 ,第 52 6位突变 7株 ,第 533位突变 3株。未检测到第 51 6位、第 51 3位碱基突变。结论　该方法可用于临床结核分支杆菌对利福平耐药性的快速检测

引用

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共 6 条

[1]

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