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精编分子生物学实验指南.[M].(美)F.奥斯伯(FrederickM.Ausubel)等著;颜子颖;王海林译;.科学出版社.1998,
耐盐及苯乙酸、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建
被引：12
作者：
刘智
洪青
徐剑宏
张国顺
李顺鹏
机构：
[1] 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室
[2] 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室 南京
[3] 南京
来源：
关键词：
耐盐;
苯乙酸;
甲基对硫磷;
降解;
三亲杂交;
工程菌;
D O I：
10.13343/j.cnki.wsxb.2003.05.003
中图分类号：
Q78 [基因工程（遗传工程）];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
H1 (Halomonassp.)是一株耐高盐浓度 (1 8%NaCl,W V)和降解苯乙酸的菌株 ,pDT3质粒为pUC1 9插入甲基对硫磷水解酶基因 (mpd基因 )构建而成。采用HindⅢ酶切 ,获得含有完整mpd基因片段 ,克隆到广宿主质粒pKT2 3 0和pBBR1 MCS2上 ,构建成质粒pKT MP和pBBR MP。通过三亲杂交 ,在辅助质粒pRK2 0 1 3的帮助下 ,将质粒pKT MP和pBBR MP转移到H1中 ,得到的工程菌H pKT MP和H pBBR MP具有耐盐、降解苯乙酸和水解甲基对硫磷的功能 ,其中H pBBR MP水解酶活性与亲本菌株甲基对硫磷降解菌 (Pseudomonasputida)DLL E4相当 ,而H pKT MP水解酶活性要提高 1倍左右。经过传代试验 ,证明了工程菌的稳定性
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页数：6
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