用多基因PCR检测和区分不同群型霍乱病原菌

被引：4

作者：

芮勇宇

蔡初的

萧斌权

俞守义

李建基

廖育煌

王红

钟豪杰

罗不凡

机构：

[1] 北京市中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所,广东省卫生防疫站,广州市卫生防疫站,广州市第一军医大学流行病学教研室,广东省卫生防疫站,广州市卫生防疫站,广州市第一军医大学流行病学教研室,广东省卫生防疫站,广州市卫生防疫站

来源：

中华预防医学杂志 | 2000年 / 05期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

弧菌,霍乱; 聚合酶链反应; 基因型; 分类;

D O I：

暂无

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

目的　建立一种快速、敏感的诊断方法 ,用于检测和区分霍乱弧菌O1群古典型 (CVC)、埃尔托型 (EVC)、O139群和非O1非O139群。方法　分别针对霍乱弧菌肠毒素A亚单位 (ctxA)基因、O139群特异基因、霍乱弧菌溶血素A亚单位 (hlyA)基因和毒力协同调节菌毛A亚单位 (tcpA)基因设计引物 ,建立多基因PCR方法。PCR产物经电泳 ,根据扩增条带的大小和数目 ,可检测和区分CVC、EVC、O139群和非O1非O139群。针对ctxA和O139群特异基因分别设计一对内引物 ,建立套式PCR。结果　对分离于患者的 6 0株EVC ,2株CVC ,15株O139群和 30株非O1非O139群进行检测 ,扩增结果与设计均一致。多基因PCR敏感性可达到 10 0cfu ,套式PCR可达到 10cfu。对分离于环境标本的 10株EVC和 15株O139群检测表明 ,前者均为产毒株 ,后者均为非产毒株。结论　该方法快速、特异、敏感 ,具有较大的应用价值。

引用

页码：23 / 25

页数：3

共 5 条

[1]

Distribution of serogroups of Vibrio cholerae non-O1 non-O139 with specific reference to their ability to produce cholera toxin, and addition of novel sreogroups. Yamai S,Okitsu T,Shimada T,et al. Kansenshogaku ZasshiKansenshogaku Za . 1997

[2]

Development and evaluation of a multiplex PCR assay for rapid detection of toxigenic Vibrio cholerae O1 and O139. Hoshinok K,Yamasaki S,Mukhopadhyay AK,et al. FEMS Immunology and Medical Microbiology . 1998

[3]

Multiplex PCR for Vibrio cholera. Shangkuan YH. Journal of Applied Bacteriology . 1995

[4]

Structure and function of choler toxin and related TcpA pilin sequence and colonization requirements for O1 and O139 Vibrio cholerae. Spangler MD. Molecular Microbiology . 1994

[5]

Rapid detection of Vibrio cholerae O139 Bengal from stool specimens by PCR. Albert MJ,Islam D,Nahar S,et al. Journal of Clinical Microbiology . 1997

← 1 →