凝胶色谱法半制备级纯化单克隆抗体

被引:6
作者
刘智广
陈志术
刘成刚
陈志南
徐力青
机构
[1] 第四军医大学肝癌导向药物课题组
关键词
抗体,单克隆;纯化;凝胶色谱法;
D O I
暂无
中图分类号
R392-33 [免疫学技术、设备及实验方法];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
作者采用SePllacylS-200凝胶色谱柱,在快速蛋白液相色谱系统(FPLC)建立了肝癌相关抗原单克隆抗体半制各级纯化方法。该法是将McAb腹水经40%饱和硫酸铵盐析粗分离后,再用凝胶色谱纯化,一次上样量相当于5~10ml腹水,可得纯化McAb30~60mg,得率为6~6.5mg/ml腹水,回收率为63%,一次色谱纯化周期2h,整个分离纬化可在3h内完成。经SDS—PAGE和DEAE离子交换色谱法检测McAb纯度大于80%,ABC染色法测定McAb活性为,1:40000(1.56×10-10mol/L),是一般实验室纯化IgG类McAb的实用方法。
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