嗜热链霉菌过氧化氢酶的纯化及性质研究

嗜热链霉菌（Thermostreptomyces sp.）T485的除去菌体的培养液,经硫酸铵盐析,Sepha-dex G-100、DEAE-Sephadex A-50及羟基磷灰石等柱层柝,得到了凝胶电泳均一的过氧化氢酶,纯化了954倍,得率为7%。用浓度梯度 PAGE 测定分子量为152000,SDS-PAGE 测定亚基分子量为57000,凝胶薄层等电点聚焦测定等电点为4.25。过氧化氢酶的反应最适温度为60℃,最适 pH 为7.0;对 H2O2的 Km 为50mmol.L-1,Vmax值为6.0 mmol·min-1·mg-1。NaN3和 Hg2+对酶活力有强烈抑制作用,Ca2+对酶活力有激活作用。测定了波长200—500nm 的吸收光谱,在405nm 处有明显的吸收峰。根据受 NaN3抑制和吸收光谱性质,推测它为含血红素酶。此外还测定了过氧化氢酶的氨基酸组成。