长春新碱耐药结肠癌细胞株HCT-8/VCR的建立及其耐药机制的初步研究

被引:5
作者
李长龙 [1 ,2 ]
刘建文 [1 ]
萨晓婴 [2 ]
邓皖利 [3 ]
许建华 [3 ]
范忠泽 [3 ]
机构
[1] 华东理工大学药学院药物科学系
[2] 浙江省医学科学院实验动物中心实验动物与安全性研究重点实验室
[3] 上海中医药大学附属普陀医院中医肿瘤科
关键词
结肠肿瘤; 长春新碱; 抗药性,肿瘤; 细胞系,肿瘤;
D O I
暂无
中图分类号
R735.35 [];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的:建立长春新碱(vincristine,VCR)耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞株的多药耐药机制。方法:通过逐步增加药物浓度的方法建立VCR耐药结肠癌细胞株。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,P-糖蛋白(P-gp)测定采用FCM方法,细胞内VCR浓度测定采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法,多药耐药相关基因(MDR1、MRP1)的表达采用RT-PCR方法检测。结果:HCT-8/VCR的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株HCT-8相似。HCT-8/VCR对VCR的耐药倍数分别为19.7,对其他4种化疗药物也表现出不同的抗性。HCT-8/VCR细胞内VCR和DOX的累积量降低(P<0.01),且其细胞表面P-gp表达增加(P<0.01),MDR1 mRNA增加,但MRP1 mRNA没有变化。结论:建立了对VCR产生耐药的结肠癌细胞株HCT-8/VCR,其耐药机制可能为P-gp过量表达导致细胞外排活性增强,预期该细胞株可用于以P-gp为靶点的多药耐药逆转剂的研究。
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