单纯疱疹病毒Ⅰ型DNA聚合酶的纯化和特性及对一些已知抗生素敏感性的研究

被引：2

作者：

陶佩珍

王淑琴

机构：

[1] 中国医学科学院抗菌素研究所

来源：

抗生素 | 1985年 / 06期

关键词：

DNA; HSV; 正常细胞; 诱导酶; 体外模型; 抗生素; 单纯疱疹病毒Ⅰ型; 缓冲液; 酶活性; 酶活力; 盐浓度; 酶的纯化;

D O I：

10.13461/j.cnki.cja.000862

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

本文报道单纯疱疹病毒Ⅰ型DNA聚合酶（HSV-1 DNA pol）的提纯,特性及药物抑制试验。应用高盐提取,序列通过DEAE-纤维素,P11-纤维素二种离子交换柱层析及DNA-纤维素亲和层析,由HSV-1感染BHK细胞内可制备相当纯的HSV-1 DNA pol。该酶最适盐浓度为200mM KCl;最适镁离子浓度为2mM;对4个底物的米氏常数为3μM。特异的HSV-1 DNA pol抑制剂——膦羧基甲酯及膦羧基乙酯抑制50％酶活性的剂量(ID50)分别为0.42μM及0.46μM,而二者抑制L1210 DNA polα的ID50为32μM及40μM。特异的正常细胞DNA α抑制剂——N乙基马来酰亚胺lmM抑制90％L1210 DNA pol α的活性,同样浓度对HSV-1 DNA pol活性无影响。我们选择不同化学类别具有不同作用机制的已知抗生素及其它药物27个,测定了它们在体外抑制HSV-1 DNA pol的作用。结果显示病毒诱导酶的体外模型有相当特异性并对其在筛选抗病毒抗生素中的应用进行了讨论。

引用

页码：336 / 341+335 +335

页数：7

共 18 条

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