鸡白细胞介素-2 cDNA克隆

被引:12
作者
李祥瑞
金红
卢景良
机构
[1] 南京农业大学动物医学院
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
[3] 兽医生物技术国家重点实验室
关键词
鸡;白细胞介素-2;cDNA;克隆;
D O I
暂无
中图分类号
S858.310.42 [];
学科分类号
摘要
用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡IL-2cDNA。以ConA(20μg/mL)诱导SPF鸡脾脏淋巴细胞,第20小时收集细胞,提取mRNA,以SuperScriptPlasmidSystemforcDNASynthesis试剂盒合成cDNA,定向连结于穿梭质粒pSV·SportⅠ,构建cDNA文库。将文库分组提取重组质粒,转染COS-7细胞,表达cDNAs。以淋巴细胞增殖试验检测表达产物IL-2活性。经过3轮筛选,获得14个具有IL-2活性的克隆。选择其中4个进行酶切分析,结果显示这4个cDNA大小分别为1.5,1.0,0.8和0.8kb。
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