猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立

被引：6

作者：

钟金栋 ^{[1
]}

花群义 ^{[2
]}

夏雪山 ^{[1
]}

杨云庆 ^{[2
]}

周晓黎 ^{[2
]}

董俊 ^{[2
]}

机构：

[1] 昆明理工大学生化学院

[2] 云南省出入境检验检疫局技术中心

来源：

中国农学通报 | 2006年 / 12期

关键词：

猪水泡病病毒; RT-PCR; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

根据基因库中的猪水泡病病毒(SVDV)高度保守的VP1基因的序列,设计了与SVDV互补的2对特异性引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地扩增出251bp和366bp特异性条带,将其克隆入pMD18-T载体中,并进行序列测定,与已发表的SVDV基因比较发现,核苷酸的同源性为100%,证实为SVDV的VP1段基因。通过检测FMDV、VSV、BHK21细胞等,对照的扩增结果均为阴性,验证其特异。对SVDVRNA进行10倍系列稀释后检测,结果SVDVRNA在10-4稀释度时仍能检测到阳性,说明具有较好的敏感性。此项试验能稳定、高效、快速地检测出猪水泡病病毒。

引用

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页数：3

共 4 条

[1]

An enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)for the detection and quantification of antibodies against swine vesicular disease virus. Armstrong R M,,Barnett T R. Journal of Virology . 1989

[2]

Development of two novel monoclonal antibody-based ELISAs for the detection of antibodies and the identification of swine isotypes against vesicular dis ease virus. Brocchi E,,Berlinzani A,Gamba D,et al. Journal of Virology . 1995

[3]

Isotype specific ELISAs to detect anti-bodies against seine vesicular disease virus and their use in epidemiolog. Dekker A,,van Hemert-Kluitenberg F,Baara C,et al. Epidemiology and Infection . 2002

[4]

Detection of swine vesicular disease virus RNA by reverse transcription-polymerase chain reaction. Lin F,,Mackay D K,Knowles N J. Journal of Virology . 1997

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