小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究

被引:9
作者
成军
柯亨宁
刘妍
斯崇文
王勤环
洪卫国
钟彦伟
机构
[1] 解放军三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心!北京,北京医科大学第一医院感染疾病科!北京,解放军三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心!北京,北京医科大学第一医院感染疾病科!北京,北京医科大学第一医院感染疾病科!北京,解放军三○二医院
关键词
白细胞介素-18; 逆转录多聚酶链反应; cDNA; 基因克隆化; 基因表达;
D O I
暂无
中图分类号
R392.11 [免疫分子生物学(免疫化学)];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
克隆小鼠白细胞介素 18(IL 18)编码区的cDNA ,并实现在真核细胞中的表达。方法 :用小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA核苷酸序列 ,设计、合成基因序列特异性引物 ,应用逆转录多聚酶链反应RT PCR ,以植物血凝 (PHA)和细菌脂多糖 (LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板 ,扩增获得全长mIL 18,转染小鼠成纤维细胞系SVT2 ,并进行IL 18生物学活性的检测。结果 :经测序证实获得的小鼠IL 18的cDNA序列与文献报道的mIL 18的cDNA序列完全一致。构建的小鼠IL 18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后 ,获得具有生物学活性mIL 18的分泌表达。结论 :克隆了小鼠IL 18的cDNA ,并实现了在真核细胞中的表达。
引用
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