链霉菌M1033 D-木糖异构酶的分子克隆

被引：5

作者：

朱学良

王玉珍

黄震

刘兢

崔涛

董婉治

牛立文

徐洵

机构：

[1] 中国科学技术大学生物系

来源：

生物工程学报 | 1992年 / 03期

关键词：

链霉菌M1033; 克隆; D-木糖异构酶基因;

D O I：

10.13345/j.cjb.1992.03.005

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

链霉菌M1033染色体DNA经BamH Ⅰ酶解后电泳,Southern转移。根据自测的链霉菌ML033 D-木糖异构酶氨基酸序列设计合成寡聚核苷酸探针X-2、X-3,以X-2、X-3及Ampullariella sp3876 D-木糖异构酶基因(1.17kb)为探针进行杂交,确定与上述探针杂交最强处在15kb左右。从胶上分离出9—20kb大小的片段,克隆到EMBL 3载体中,经杂交筛选后,得到0.6%的阳性噬斑,其插入大小为13kb。将插人DNA的Sal Ⅰ酶解片段(2.5kb)进一步亚克隆于pUC18,得到重组质粒pUB 1,经酶解图谱、部分序列分析和互补实验确定pUB1含有完整的M1033 D-木糖异构酶基因

引用

页码：232 / 236+310 +310

页数：6