臭鼻杆菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表达

被引：8

作者：

张金文 ^{[1
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熊春蓉 ^{[2
]}

李静雯 ^{[1
]}

王旺田 ^{[1
]}

孟亚雄 ^{[1
]}

陈正华 ^{[3
]}

机构：

[1] 甘肃农业大学农学院

[2] 甘肃省农业技术推广总站

[3] 甘肃省亚盛集团博士后流动站

来源：

草业学报 | 2006年 / 06期

关键词：

腈水解酶基因; pET28a(+); 酶活性; 温度; 乳糖;

D O I：

暂无

中图分类号：

X172 [环境微生物学];

学科分类号：

071012 ; 0713 ;

摘要：

通过PCR技术从克雷伯氏臭鼻杆菌基因组DNA中克隆到编码腈水解酶的基因(bxn),插入pET28a(+)载体的NcoI和SacI之间,构建了bxn基因的原核生物表达载体pET-BX。通过SDS-PAGE鉴定出重组克隆,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出了一种37.7 kD的特异蛋白,其表达量占宿主菌总蛋白的18.2%。在添加终浓度为4mmol/L的乳糖和28℃培养条件下,重组克隆菌可表达较高产量的特异酶蛋白,可将溴苯腈降解为无毒物质,并具有较高活性。

引用

页码：87 / 92

页数：6

共 10 条

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