一种简单实用的适于大、小质粒的DNA提取方法

被引：15

作者：

徐建国

刘志奇

刘汉明

机构：

[1] 中国预防医学科学院流行病学和微生物学研究所

[2] 中国预防医学科学院流行病学和微生物学研究所北京

[3] 北京

来源：

微生物学通报 | 1991年 / 01期

关键词：

质粒DNA提取法; 醋酸铵; 异丙醇;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.1991.01.014

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

以Birabolm和Doly的质粒提取方法为基础,用醋酸铵取代醋酸钠,沉淀染色体DNA和RNA,用异丙醇取代乙醇沉淀质粒DNA,降低了质粒DNA标本中蛋白质和RNA的含量,减少了标本体积。并发现在质粒DNA标本中加入冷异丙醇或冷乙醇后,在-70℃、-20℃、-10℃、4℃和室温下作用,对质粒DNA的回收量无明显影响,在质粒DNA标本中加入冷异丙醇后,在4℃作用0、10、20和30分钟,对质粒DNA的回收量无明显影响。用该方法提取的质粒DNA可直接用于限制性内切酶消化。用该方法提取大肠埃希氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌的质粒DNA均获成功,适用于提取分子量为140Md的大质粒和分子量为3.23Md的小质粒。

引用

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