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BrdU体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的研究
被引：89
作者：
冯善伟
姚晓黎
李中
柳太云
黄文
张成
机构：
[1] 中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州
来源：
关键词：
尿嘧啶核苷酸类;
流式细胞术;
细胞,培养的;
细胞分离;
造血干细胞;
骨髓细胞;
D O I：
暂无
中图分类号：
R-331 [实验方法与设备];
学科分类号：
100234 [放射肿瘤学];
摘要：
目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)最佳标记时间、剂量。方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测最佳标记剂量;在细胞生长融合前72、48、36、24、12、3h加入BrdU,使终浓度为10μmol/L,并分别孵育至细胞融合,测定BrdU的标记率,找出最佳标记时间;免疫组化分析BrdU标记率。结果流式细胞仪检测所标记的细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,并且连续传5代均可检测到。结论传代后贴壁生长的梭形细胞为MSCs,终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,且可以连续检测到,提示BrdU标记可用于MSCs移植入体内后存活、生长和分化的动态观察。
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