rHPLC定量分析血浆Hcy方法的比较研究

目的 :建立一种高效简单的血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的定量分析法。方法 :以N -乙酰半胱氨酸为内标 ,SBD -F为衍生剂 ,分别使用硼氢化钠和3 -丁基膦为还原剂及磷酸盐和乙酸盐为流动相 ,应用反相高效液相色谱 -荧光检测器(rHPLC -FD) ,在测定Hcy 标准品的基础上 ,测定63例健康人血浆Hcy 浓度。结果 :所有色谱图均有较好分离效果。应用硼氢化钠为还原剂和磷酸盐为流动相的方法检测Hcy 浓度 ,其最小检测限为1.0μmol/L ,批间差异为4.48 % ,批内差异为4.20 % ,回收率为(98.62±5.05) %。测得健康成人血浆平均Hcy 浓度为(10.11±1.91)μmol/L。同份样品用硼氢化钠还原比用3 -丁基膦还原反应快 ,但色谱图杂峰多 ,用磷酸盐为流动相洗脱时间略长 ,但对色谱柱损害小。结论 :本方法适用于临床实验室对Hcy 的常规定量测定。3 -丁基膦更适合为Hcy 的还原剂 ,使用磷酸盐为流动相可延长色谱柱的使用寿命。