人骨髓间充质干细胞体外扩增的生物学评估

被引：40

作者：

夏文杰 ^{[1
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许茹 ^{[2
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叶欣 ^{[1
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付涌水 ^{[1
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罗广平 ^{[1
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丁浩强 ^{[1
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项鹏 ^{[2
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张秀明 ^{[2
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邓晶 ^{[1
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陈扬凯 ^{[1
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机构：

[1] 广州血液中心器官移植配型中心

[2] 中山大学干细胞与组织工程研究中心

来源：

中国实验血液学杂志 | 2008年 / 03期

关键词：

骨髓间充质干细胞; 成骨; 成脂; STR; HLA;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.28 [];

学科分类号：

摘要：

本研究旨在对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)进行移植前增殖分化能力测定,病毒学检查,核型分析,PCR-STR和HLA的检测,以便为临床应用提供安全、可靠的移植细胞。采用贴壁法分离骨髓MSC,在相同条件下分别考察各代细胞形态、生长、表面标记、成骨、成脂分化能力的变化情况,并进行不同生长时期的核型分析,利用HLA-SBT技术检测4个不同供者来源的MSC的HLA-I和HLA-II位点的高分辨分型;应用PCR-STR技术检测4个不同供者来源的MSC基因遗传标记。并且利用ELISA方法检测HIV,HBV,HCV和TP,使用PCR方法检测支原体污染。结果表明:随着传代次数增加,MSC的增殖能力、成骨能力均有所下降。在扩增过程中,MSC始终保持较高的纯度,CD29、CD44、CD105、CD166、CD73均表达阳性,CD14、CD34、CD45、CD80和CD86均表达阴性。在8代以前未发现核型变异。4个不同供者来源的MSC的HLA高分辨分型和STR基因分型结果为MSC3的TP表达阳性,MSC2在5代出现支原体污染。结论:在体外培养过程中MSC干细胞特性逐渐丢失,其中向成骨方向的分化潜能降低。MSC在8代以前可作为实验研究及临床应用的良好对象。

引用

页码：639 / 644

页数：6

共 5 条

[1]

人骨髓间充质干细胞分离鉴定方法的改进 [J].