二氢嘧啶脱氢酶、胸苷酸合成酶、c-myc和p53基因在小鼠肝组织中表达的昼夜节律性研究(英文)

背景与目的:5-Fluorouracil(5-FU)主要通过抑制胸苷酸合成酶发挥抗癌作用,而二氢嘧啶脱氢酶是5-FU体内代谢的一个起始酶和限速酶。在本研究中,我们对二氢嘧啶脱氢酶、胸苷酸合成酶、c-myc和p53基因在小鼠肝脏中表达的昼夜节律进行研究。方法:本实验共采用了24只雄性B6D2F1小鼠。所有实验动物在实验中进行了4周光照同步化(12h光照:12h黑暗)。体温和休息-活动节律通过腹腔埋置的微型感受器进行动态监测。动物分别在3,7,11,15,19,23HALO(灯亮后小时数)被处死并取出肝脏冻存。肝脏标本中抽提的总RNA用LightCycler-SYBRGreenITM扩增系统进行实时定量RT-PCR。结果:小鼠的体温和休息-活动均呈现明显和相似的昼夜节律,其峰值均位于黑暗期(相当于小鼠活动相),谷值则位于光照期(相当于小鼠休息相)。二氢嘧啶脱氢酶在mRNA水平呈现出明显的昼夜节律性,其峰值时间位于16HALO左右即位于小鼠活动相(P=0.0012)。胸苷酸合成酶在mRNA水平具有昼夜节律表达的趋势,其峰值时间出现在光照期(P=0.079)。C-myc和p53在mRNA水平的节律性表达在本实验中无统计学意义。结论:二氢嘧啶脱氢酶和胸苷酸合成酶在mRNA水平呈现出昼夜节律性,二者峰值时间相差约12h,这一结果提示可以利用二者在转录水平的时间差异用5-FU进行时间化疗。