Caspase-3融合蛋白基因的构建及其对HeLa细胞凋亡的诱导作用

被引：19

作者：

贾林涛

于翠娟

许彦鸣

朱峰

彭玮丹

苏成芝

王成济

杨安钢

机构：

[1] 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室!陕西西安

[2] 第四军医大学基

来源：

第四军医大学学报 | 2001年 / 12期

基金：

国家杰出青年科学基金;

关键词：

天冬氨酸蛋白酶类; 脱噬作用; 肿瘤; 基因疗法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的　观察重构型 caspase- 3及其 N-端融合蛋白的表达对 He L a细胞的凋亡诱导作用 .方法　用反转录 PCR获取人 caspase- 3基因 ,用重组 PCR方法构建人重构型 caspase-3及其融合蛋白基因 ,将基因克隆入表达载体 pc DNA3,脂质体法转染 He L a细胞 ,通过细胞计数、电镜观察、MTT法等检测被转染细胞的生长及其凋亡状况 .结果　成功获得了 cas-pase- 3基因 ,构建了重构型 caspase- 3基因和重构型 caspase- 3与绿脓杆菌外毒素 (PE)转膜结构域部分肽段的融合蛋白基因及其表达载体 ,与对照组相比 ,在转染后 1～ 4d内 ,两种基因的表达均导致 He L a细胞存活数减少 ,大量细胞发生凋亡 ,且二者活性相当 .结论　重构型 caspase- 3及其融合蛋白可以诱导转染的 He L a细胞发生凋亡

引用

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