外源性PTEN基因诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡

目的　研究外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。方法　应用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3 .1 PTEN,以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株MDA468,对照组为pcDNA3 1( -)空载体质粒转染组和未转染组。应用RT -PCR、Western印迹法分析目的基因的表达;在表皮生长因子(EGF)的诱导下,采用Western印迹方法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达及细胞在黏附和失黏附状态下的黏着斑激酶的表达;膜联蛋白V- FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果　RT- PCR、Western印迹显示pcDNA3. 1 -PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达,且在EGF的诱导下,p -Akt及p- FAK蛋白表达下调。流式细胞术则显示其凋亡率达21. 68%。结论　外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。