活化Notch1信号下调Wnt信号抑制结肠癌细胞增生

被引:8
作者
钱翠娟 [1 ]
姚军 [2 ]
谭诗云 [3 ]
机构
[1] 浙江省台州市立医院消化内科
[2] 台州学院医学院检验系
[3] 武汉大学人民医院消化内科
关键词
人结肠癌细胞; Notch1(ICN); 重组反转录病毒载体; β-catenin;
D O I
暂无
中图分类号
R735.35 [];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,研究过度活化Notch1信号对人结肠癌细胞HT-29细胞增生的影响作用及机制。方法将人Notch1基因胞内区(ICN)克隆至反转录病毒载体pCLNRX中,与包装载体pCL-10A1共转染293细胞,制备重组病毒上清,检测病毒效价。MTT法检测稳定表达外源性ICN对细胞生长的影响,RT-PCR及Western Blot检测c-Myc、β-catenin表达水平。结果成功构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,通过共转染获得了具有较高效价的重组反转录病毒。通过表达外源性ICN而过度活化Notch1抑制HT-29的生长,并下调Wnt信号途径关键调控分子β-catenin的蛋白表达水平,但对β-catenin的mRNA水平未见明显影响。而且过度活化Notch1对c-Myc的蛋白及mRNA表达水平均无明显影响。结论过度活化Notch1信号部分通过下调Wnt信号而抑制HT-29的生长,且该作用不依赖c-Myc的抑制。
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页数:5
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