BMP-2重组质粒转染人骨髓基质干细胞及表达蛋白的诱导活性观察

被引:9
作者
李建军
韩东
刘建国
孙鸿斌
王宏
王玲
徐莘香
机构
[1] 吉林大学附属第一医院骨科
[2] 吉林大学中日联谊医院手外科
[3] 吉林大学白求恩基础医学院分子生物学教研室
[4] 吉林大学附属第一医院骨科 长春市
[5] 长春市
关键词
骨形态发生蛋白; 基因转染; 骨髓基质干细胞; 血管内皮生长因子;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
目的构建骨形态发生蛋白-2(BMP-2)真核表达质粒,使其在人骨髓基质干细胞(hBMSCs)中表达,并观察表达产物的诱导成骨活性。方法在脂质体介导下将BMP-2基因导入hBMSCs,流式细胞仪、ALP检测和VEGF探针原位杂交分析其对细胞增殖、ALP活性和VEGF表达的影响。并利用转染后的培养液上清诱导小鼠成纤维细胞(L929),检测其骨钙素、Ⅱ型胶原表达。结果转染后细胞稳定表达BMP-2基因,S期细胞比例增多,ALP活性和VEGF的表达明显增加。且诱导L929细胞骨钙素、Ⅱ型胶原阳性表达。结论BMP-2重组质粒转染hBMSCs后表达目的蛋白,促进自身增殖、分化和上调VEGF的表达,并诱导成纤维细胞向成骨细胞转化,为BMP-2基因治疗奠定了实验基础。
引用
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