农杆菌对毛白杨的转化及完整转化植株的获得

本文报道农杆菌转化毛白杨(Populus,tomentosa)的高效遗传转化系统的成立。所用农杆菌菌株为:1.发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)R1000,含有 Ri 质粒 pRiA4b。2.发根农杆菌 R1000(pTVK 85),是菌株 R1000中除含有 pRiA4b 外,并兼容一个带有超致病区(supervirulent region)的质粒 pTVK 85。3.根癌农杆菌(A.tumefaciens)C58C1(pBZ693),其质粒 pBZ 693是改建过的 Ti 质粒,载有 T-DNA 的基因1和基因2。根癌农杆菌诱导的根在形态上明显区别于发根农杆菌诱导的根。R1000(pTVK 85)诱导生根的外植体可占供试外植体总数的59%。转化的根有的可自发地形成不定芽或愈伤组织。通过培养基中激素的调整,可使转化的限系统100%再生出不定芽,并可由这些不定芽得到完整植株。转化植株的各克隆之间表型差异很大。取三个克隆的植株进行 Southern 杂交,其中两个为杂交阳性,表明确已被转化;另一个为杂交阴性。