脱氧尿嘧啶核苷酸掺入量对尿苷酶抗污染效果的影响

被引：10

作者：

杜绍财

吴娟

张敏

刘峰

韩建德

机构：

[1] 北京大学人民医院肝病研究所

[2] 北京大学人民医院北京肝炎试剂研制中心

[3] 北京大学人民医院

[4] 北京大学人民医院北京肝炎试剂研制中心北京

[5] 北京

[6] 级研究生北京

来源：

临床检验杂志 | 2001年 / 06期

基金：

“九五”攻关项目;

关键词：

聚合酶链反应; 尿苷酶; 丙型肝炎病毒;

D O I：

10.13602/j.cnki.jcls.2001.06.009

中图分类号：

R446.9 [其他];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的　了解脱氧尿嘧啶核苷酸 (dUTP)掺入量与尿苷酶 (UDG)抗污染的关系。方法　通过聚合酶链反应将 5 0 %dUTP和全dUTP掺入HCVcDNA ,并观察UDG的抗污染效果。结果　 0 0 5U、0 1U、0 2U的UDG 37℃消化 6 0min ,PAGE检测可抗 10 1～ 10 85 0 %dU DNA模板污染。 0 1UUDG 37℃ 10min能抗 10 6,2 0min～ 30min可抗 10 5,PAGE虽阴性 ,但DNA EIA杂交A值0 6 17,仍为阳性 ;40min可抗 10 3,未经杂交证实。 37℃消化 2 0min电泳检测可抗 10 1～ 10 8全dU DNA污染 ,DNA EIA杂交A值在 0 0 0 5～ 0 0 49均为阴性。结论　本文研究结果证实 ,用 5 0 %dU DNA为模板 ,37℃ 10～ 2 0min时 ,抗污染效果较差 ,需增加抗污染时间。应用全dU DNA为模板时 ,可获得良好的抗污染效果

引用

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