目的:建立同时测定牛黄上清丸中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚4种蒽醌类化合物含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为甲醇-0.5%磷酸(75∶25,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为230 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果:大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚检测质量浓度线性范围分别为1.50~150、0.95~95、1.30~130、1.15~115 mg/L(r≥0.995 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率分别为97.03%100.40%(RSD=1.23%,n=9)、98.37%102.50%(RSD=1.15%,n=9)、98.03%101.10%(RSD=1.05%,n=9)、97.83%104.5%(RSD=2.16%,n=9)。结论:该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于牛黄上清丸中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚4种蒽醌类化合物含量的测定。