棉花黄萎病菌gDNA提取方法和不同单孢的RAPD分析

被引：7

作者：

刘学堂

郭金城

张元恩

宋晓轩

孙君灵

李为

机构：

[1] 中国农业科学院棉花研究所农业部棉花遗传改良重点实验室!河南安阳

[2] 中国农业大学植物科技学院植病系!北京

[3] 中国农业

来源：

河南农业大学学报 | 1999年 / 03期

关键词：

棉花黄萎病菌; DNA提取; 单孢; RAPD分析;

D O I：

10.16445/j.cnki.1000-2340.1999.03.019

中图分类号：

S435.621 [病害];

学科分类号：

摘要：

选用棉花黄萎病菌代表性的菌系Ｖａ（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍａｌｂｏａｔｒｕｍ的一个菌株）和Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅ的落叶型菌系ＶＤ－８，Ｔ９及非落叶型菌系Ｊｙ（致病力较强的泾阳菌系），以Ｋｅ（致病力较弱的库尔勒菌系）作为实验对象，研究了ＣＴＡＢ和氯化苄２种提取方法的优劣．结果表明：ＣＴＡＢ法比氯化苄法提取的ＤＮＡ片段长（５０ｋｂ），纯度高（ＯＤ２６０／ＯＤ２８０＝１５６），且稳定、无污染，适合于常规分子生物学研究；该提取方法中ＥＤＴＡ，ＮａＣｌ和β 巯基乙醇的最佳配比为１０ｍｍｏｌ，１４ｍｏｌ和２％．利用提取的５个菌系的ｇＤＮＡ对ＯＰＹ及ＯＰＢ两组引物进行了筛选，１６个引物可以扩增出多态性的谱带．利用引物对Ｖａ菌系的４个单孢进行的ＲＡＰＤ分析，从分子水平证明了不同单孢之间发生变异的可能性．

引用

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