产气荚膜梭菌实时荧光PCR方法的建立

被引：13

作者：

石玉玲

曾兰兰

陈丽丹

李林海

孙朝晖

王露霞

机构：

[1] 广州军区广州总医院检验科

来源：

生物技术通讯 | 2010年 / 21卷 / 03期

关键词：

产气荚膜梭菌; TaqMan探针; 荧光定量PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q503 [生物化学技术];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

目的:利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的检测产气荚膜梭菌的方法。方法:以产气荚膜梭菌基因为靶序列设计引物和探针,以自产气荚膜梭菌菌株中提取的DNA为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的特异性、敏感性。结果:建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L、下游引物浓度为0.15μmol/L、探针浓度为0.3μmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与创伤弧菌等12种相关细菌均无交叉反应;对纯菌检测的灵敏度低于10 CFU/反应体系。结论:建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对战时气性坏疽做出快速准确的报告,实现对这种战时高发疾病的安全、快速和定量检测。

引用

页码：389 / 392

页数：4

共 5 条

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