对硫磷人工抗原合成及其鉴定

目的　制备对硫磷人工抗原和抗血清 ,为建立酶联免疫吸附法提供技术储备。方法　还原对硫磷硝基成为氨基 ,合成半抗原氨基对硫磷 ;重氮化偶联大分子载体牛血清白蛋白制备人工抗原 ;免疫新西兰白兔 ,进行多抗制备。结果　合成的半抗原核磁共振图谱鉴定结果为δ :6 9～ 7(m ,2H ,CH2 ) 6 4～ 6 5 (m ,2H ,CH2 ) 4 1～ 4 2 (q ,4H ,-CH2 ) 3 4 (s ,2H ,NH2 ) 1 3～ 1 4 (t,6H ,CH3 ) ;氨基对硫磷与牛血清白蛋白的结合比为 35～ 36∶1;抗血清经间接酶联免疫吸附法检测 ,效价达 1∶12 80 0 0 ,双向免疫扩散实验测得抗血清与人工抗原形成沉淀 ;间接竞争酶联免疫吸附法测得抗血清对对硫磷最低抑制浓度为 0 16ng/mL ;经间接酶联免疫吸附法检测人工抗原与羊抗人血清、兔抗人血清、正常兔血清无交叉反应。结论　合成对硫磷半抗原及人工抗原纯度高、结合比高 ,具有较好的免疫原性。