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UreA/KatA双价减毒沙门菌疫苗株抗幽门螺杆菌的免疫保护作用
被引:11
作者:
廖文俊
陈旻湖
朱森林
陈洁
陈为
王锦辉
胡品津
机构:
[1] 中山医科大学附属第一医院消化内科
[2] 中山医科大学附属第一医院消化内科 广州博士
来源:
基金:
广东省科技计划;
广东省自然科学基金;
关键词:
幽门螺杆菌;
疫苗;
尿素酶;
过氧化氢酶;
鼠伤寒沙门菌;
D O I:
暂无
中图分类号:
R392 [医学免疫学];
学科分类号:
100102 ;
摘要:
目的 探讨由 2种幽门螺杆菌 (Hp)抗原组合的双价疫苗在防治Hp感染中的作用以及减毒鼠伤寒沙门菌作为传递Hp抗原的活疫苗载体的可行性。方法 PCR技术扩增尿素酶A亚单位 (ureA)和过氧化氢酶 (katA)基因片段 ,构建表达UreA KatA融合蛋白的重组质粒 ,重组质粒宿主菌经IPTG诱导 ,用SDS PAGE和Westernblot分析UreA KatA的表达情况。将该重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1株中构建重组口服活疫苗株 ,经口服免疫C5 7BL 6小鼠 ,再用Hp悉尼株进行攻击 ,用快速尿素酶试验和细菌定量培养对胃粘膜中Hp的定植及生长情况进行观察。结果 SDS PAGE电泳图上显示 1条相对分子质量 (Mr)约 10 8× 10 3 的新生蛋白带 ,占细菌总蛋白的 5 % ,并能与抗GST抗体发生特异性反应。动物实验结果显示 ,经UreA KatA双价疫苗免疫的小鼠能有效防御Hp的感染。结论 表达UreA KatA融合蛋白的双价减毒沙门菌疫苗株能诱导抗Hp保护性免疫反应 ,有望在Hp感染及其相关性疾病的防治中发挥积极作用。
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