间日疟原虫pvMSP1-19基因重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建与鉴定

被引:7
作者
陈勇 [1 ]
夏惠 [2 ]
陶志勇 [2 ]
刘丹 [2 ]
高颖 [2 ]
方强 [2 ]
李光友 [2 ]
机构
[1] 蚌埠医学院科研中心
[2] 蚌埠医学院病原生物学教研室
关键词
疟原虫,间日; pvMSP1-19; 耻垢分枝杆菌; 表达; 免疫反应性;
D O I
10.13350/j.cjpb.2011.07.012
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的体外扩增间日疟原虫pvMSP1-19基因,构建大肠埃希菌-穿梭质粒PMV261/pvMSP1-19和电转化耻垢分枝杆菌。方法采用聚合酶链反应(PCR),体外扩增间日疟原虫的pvMSP1-19基因,克隆入PMD19-T载体,构建亚克隆PMV/pvMSP1-19大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒;电转化方法将PMV/pvMSP1-19穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌中。并热诱导此重组分枝杆菌,SDS-PAGE电泳观察pvMSP1-19蛋白的表达,Western blot鉴定其免疫学活性。结果成功扩增了间日疟原虫pvMSP1-19基因,并且正确构建PMV/pvMSP1-19穿梭质粒和转化耻垢分枝杆菌。采用Westernblot证实该重组耻垢分枝杆菌表达的pvMSP1-19蛋白能被间日疟患者的血清识别。结论构建的重组耻垢分枝杆菌能表达pvMSP1-19蛋白,该蛋白具有免疫反应性,为pvMSP1-19基因重组BCG疫苗的研制提供了必要的基础。
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页数:4
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