康莱特注射液诱导肝癌细胞凋亡及其对凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9表达的影响

目的:探讨康莱特注射液(Kanglaite)对人肝癌BEL-7404细胞的增殖抑制作用、凋亡诱导作用以及对凋亡蛋白pro-caspase-3和caspase-9表达的影响。方法:采用MTT法检测康莱特注射液和阳性对照顺铂(cisplatin,DDP)对BEL-7404细胞的增殖抑制作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核的情况,FCM检测细胞凋亡率,Western印迹法检测凋亡蛋白procaspase-3和caspase-9的表达。结果:MTT结果显示,经不同体积浓度康莱特注射液(10、20、40、80及160μL/mL)作用BEL-7404细胞后,80μL/mL康莱特注射液作用48 h时对肝癌BEL-7404细胞有明显的抑制增殖作用;Hoechst 33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;FCM法检测结果提示,空白对照组、DDP 10μg/mL组和康莱特注射液80μL/mL组的凋亡率分别为(1.23±0.40)%、(32.53±0.65)%和(3.13±0.32)%(P<0.01);Western印迹法检测结果提示,康莱特注射液及DDP作用48 h后procaspase-3蛋白的表达量明显降低(P<0.01),caspase-9蛋白的表达量显著升高(P<0.01)。结论:康莱特注射液可抑制肝癌BEL-7404细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与凋亡相关蛋白procaspase-3表达下调及caspase-9表达上调有关。