丹参酮ⅡA抗心肌纤维化作用机制实验研究

目的:研究丹参酮ⅡA(TSN)对大鼠心脏成纤维细胞(CF)内转化生长因子β1(TGFβ1)信号转导的影响,探讨TSN抗心肌纤维化的作用机制。方法:采用胰酶消化法和差速贴壁法获取新生SD大鼠CF,应用5ng/mlTGFβ1刺激及不同浓度(10-6、10-5、10-4mol/L)TSN预处理。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测纤维连接蛋白(FN)mRNA表达,Western blot检测FN和Smads蛋白表达。结果:TGFβ1在一定范围内以时间依赖方式诱导FN及Smads表达,刺激终末FN mRNA和蛋白表达量分别增加1.3倍和1.8倍(P<0.01,P<0.01),磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白表达量增加3.9倍(P<0.01)。TSN预处理可下调FN和p-Smad2/3表达,而且效应呈剂量依赖性。10-6mol/L TSN预处理对FN和p-Smad2/3表达几无影响(P>0.05,P>0.05);10-5和10-4mol/LTSN预处理后,FN mRNA表达量分别下降32.7%、42.9%(P<0.05,P<0.01),FN蛋白表达量分别下降45.8%、57.1%(P<0.01,P<0.01),p-Smad2/3蛋白表达量分别下降40.5%、55.4%(P<0.05,P<0.01)。结论:TSN抗心肌纤维化作用可能与其抑制TGFβ1诱导的Smad2/3磷酸化,阻断CF内TGFβ1/Smads信号通路有关。