荧光标记mRNA差异显示技术

被引：17

作者：

王刚石

王孟薇

尤纬缔

王宏芳

丰美福

机构：

[1] 北京解放军总医院南楼消化科!北京,北京解放军总医院南楼消化科!北京,北京解放军总医院南楼消化科!北京,中国科学院动物研究所!北京,中国科学院动物研究所!北京

来源：

中国应用生理学杂志 | 2000年 / 04期

关键词：

差异显示; 信使RNA; 荧光;

D O I：

10.13459/j.cnki.cjap.2000.04.032

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

目的 :应用荧光标记的mBNA差异显示技术。方法 :提取未经过 /经过IFN、LPS处理的三组人单核细胞系U937的总RNA并以此为模板 ,采用荧光标记的锚定引物 ,通过逆转录、差异显示PCR反应 ,经 5 .6 %变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带 ,回收后将其再扩增。结果 :三组样本的DD PCR产物电泳显示长 30 0bp～ 2 0kb不等的扩增片段 ,条带清晰、明亮 ,背景低 ,各样本相互间的差异不仅呈有无的变化 ,亦表现出很多强弱改变 ;再扩增条带锐利、单一。结论 :在本试验室成功应用了荧光标记差异显示技术 ,可快速、敏感、经济有效地筛选各种未知的表达基因

引用

页码：86 / 89

页数：4

共 2 条

[1] Improved screening of cDNAs generated by mRNA differential display enables the selection of true positives and the isolation of weakly expressed messages [J].

Zegzouti, H ;

Marty, C ;

Jones, B ;

Bouquin, T ;

Latche, A ;

Pech, JC ;

Bouzayen, M .

PLANT MOLECULAR BIOLOGY REPORTER, 1997, 15 (03) :236-245

[2]

Differences in brain gene expresion between sleep and waking as revealed by mRNA differential display and cDNA microarray technology. Cirelli C, Tononi G. Journal of Sleep Research . 1999

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