目的:观察具有诱导癌细胞凋亡的作用,并作为免疫调节剂的温莪术提取物β-榄香烯是否可协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体免疫抑制胶质瘤生长。方法:实验于2003-12/2005-08在苏州大学附属第二医院脑肿瘤研究室完成。①选用重度联合免疫缺陷SCID小鼠30只,雌雄不拘,鼠龄4～6周。温莪术提取物β-榄香烯由大连市医药科学研究所馈赠。采用化学偶联法将由解放军第二军医大学长海医院免疫室提供的CD3单抗和本室制备的SZ39抗人脑胶质瘤单抗制备为双特异性抗体。②取培养生长的人脑胶瘤体外细胞系SHG-44细胞3×108L-1,于人外周血单个核细胞转输后次日,直接注射于SCID鼠右腋皮下。将种瘤后SCID小鼠按随机抽签法分为5组:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+单个核细胞组:每天腹腔注射β-榄香烯(1.5mg/只)和双特异性抗体200μg/只,每天尾静脉注射白细胞介素2(5×105U/只),接种肿瘤前1天及第14天尾静脉注射人外周血单个核细胞(3.16×1010L-1,0.5mL,取自苏州大学附属第二医院健康志愿者2名外周血);抗体+白细胞介素2+单个核细胞组:注射3种物质剂量和方法同上组;白细胞介素2+单个核细胞组:注射2种物质剂量和方法同上组;外周单个核细胞组:注射外周单个核细胞剂量和方法同上组;对照组:尾静脉注射培养液。③记录肿瘤增殖的潜伏期,即接种日至皮下扪及微结节的时间。接种肿瘤28d后,称肿瘤质量。荧光原位杂交法测算每克肿瘤人淋巴细胞数量。苏木精-伊红染色,Olympus光学显微镜(×200)下观察肿瘤组织病理学变化。结果:SCID小鼠30只均进入结果分析。①神经胶质瘤组织病理学观察结果:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+外周血单个核细胞组和抗体+白细胞介素2+外周单个核细胞组肿瘤细胞有部分坏死,并有淋巴细胞浸润,其余各组形态相近,淋巴细胞浸润相对较少。②肿瘤增殖潜伏期:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+单个核细胞组明显长于其他4组(P<0.05),抗体+白细胞介素2+单个核细胞组明显长于白细胞介素2+单个核细胞组、外周单个核细胞组和对照组(P<0.05),白细胞介素2+单个核细胞组明显长于外周单个核细胞组和对照组(P<0.05)。③肿瘤质量:β-榄香烯+抗体组明显高于其他4组(P<0.01)。④肿瘤中人淋巴细胞浸润数量:β-榄香烯+抗体组明显多于其他4组(P<0.01)。结论:温莪术提取物可协同双特异性抗体抑制神经胶质瘤生长。
