一种简便快速的制备水稻基因组DNA PCR模板的方法

被引:5
作者
曹燕
王媛
齐进焕
于力
刘秋云
机构
[1] 中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心
基金
广东省科技计划;
关键词
煮沸法; PCR模板; Trion X-100;
D O I
暂无
中图分类号
S511 [稻];
学科分类号
摘要
目的:发展一种简便快速的制备水稻基因组DNA PCR模板的方法。方法:用枪头捣碎水稻叶片代替液氮研磨法提取水稻基因组DNA作PCR模板,在去污剂SDS和表面活性剂TrionX-100的存在下在沸水中煮沸10min,然后取上清扩增微管蛋白(TubA1)基因内含子。结果:发现在利用煮沸法提取水稻基因组DNA的过程中,用枪头捣碎叶片可代替液氮碾磨,加入0.1%表面活性剂TrionX-100煮沸叶片对制备模板有促进效果,得到了预期的PCR片断。结论:该方法快速、简便、经济,具有良好的重复性与特异性,便于自动化。
引用
收藏
页码:30 / 32
页数:3
相关论文
共 14 条
[1]  
A rapid and cheap protocol for preparation of PCR templates in peanut. Wang C T,Wang X Z,Tang Y Y,Zhang J C,Yu S L,Xu J Z,Bao Z M. Electronic Journal of Biotechnology . 2009
[2]  
Simple and relia-ble procedure for PCR amplification of genomic DNA from yeast cells using short sequencing primer. Haaning Jesper,Oxvig Claus,Overgaard M T,et al. Biochemistry and Moclecular Biology Inter-national . 1997
[3]  
High-quality plant DNA ex-traction for PCR:an easy approach. Ahmed,M,Islam,W,Arshad B,et al. Applied Genetics News . 2009
[4]   三种水稻基因组DNA快速提取方法的比较 [J].
楼巧君 ;
陈亮 ;
罗利军 .
分子植物育种, 2005, (05) :749-752
[5]   花生PCR模板提取方法的研究 [J].
李欢庆 ;
李桂玲 .
河南工业大学学报(自然科学版), 2005, (03) :60-62
[6]   一种快速稳定制备水稻PCR模板的方法 [J].
周淑芬 ;
苏军 ;
肖华山 ;
王锋 .
福建农业学报, 2004, (02) :113-116
[7]   水稻PCR扩增模板的快速制备 [J].
桑贤春 ;
何光华 ;
张毅 ;
杨正林 ;
裴炎 .
遗传, 2003, (06) :705-707
[8]   Leaf-punch method to prepare a large number of PCR templates from plants for SNP analysis [J].
Shiokai, Sachiko ;
Kitashiba, Hiroyasu ;
Shirasawa, Kenta ;
Nagano, Kuniaki ;
Nishio, Takeshi .
MOLECULAR BREEDING, 2009, 23 (02) :329-336
[9]   快速制备水稻基因组DNA PCR模板的煮沸法 [J].
赫然 ;
黄小乐 ;
刘秋云 ;
许新萍 .
植物生理学通讯, 2003, (01) :41-42
[10]   大肠杆菌质粒DNA PCR模板的快速制备 [J].
罗樨 ;
王强 ;
赫然 ;
张颖 ;
刘秋云 .
生物技术, 2002, (02) :29-29