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用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因
被引：8
作者：
邓小昭
刁振宇
何亮
乔仁良
张林元
机构：
[1] 南京军区军事医学研究所
来源：
关键词：
乙肝病毒e抗原，家蚕核多角体病毒载体，基因表达;
D O I：
暂无
中图分类号：
R394.8 [医学遗传工程];
学科分类号：
0831 ;
摘要：
以ＰＣＲ技术扩增含有Ｐｒｅ Ｃ信号肽序列及完整的ＨＢｅＡｇ基因的序列（即ＨＢｃＡｇ基因５′端４４７ｂｐ），在５′端加上合适的酶切位点，克隆到家蚕核多角体病毒转移载体ｐＢｍ０３０上，与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，空斑纯化后得到多角体基因失活的重组病毒。ＥＬＩＳＡ法测定表明培养液上清中ＨＢｅＡｇ效价达１∶３２０００，细胞内ＨＢｅＡｇ效价为１∶２０００，培养液及细胞内的ＨＢｃＡｇ含量极低（＜１∶１６０）。研究结果表明，ＢｍＮ细胞能正确识别与切割ＨＢｅＡｇ信号肽序列，所表达的ＨＢｅＡｇ效价高，纯度好，明显优于大肠杆菌表达系统
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