重组组织型纤溶酶原激活剂的纯化和鉴定

被引:6
作者
吴本传
陈昭烈
刘红
叶建新
机构
[1] 军事医学科学院生物工程研究所!北京
关键词
组织型纤溶酶原激活剂; 微孔玻璃珠; 赖氨酸-Sepharose4B;
D O I
暂无
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt PA活性回收率达到 1 4 0 % ,经SDS PAGE还原电泳分析主要为t PA蛋白 ,其中高分子t PA占 80 %左右 .用纤维蛋白自显影法检测均有溶纤活性 ,蛋白质印迹证实具有t PA的抗原性
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