用无血清培养基在填充床生物反应器生产 rHuEPO

在填充床生物反应器用含５％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ：Ｆ１２培养基培养产重组人促红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）的细胞Ｃ２８～１０ｄ后，使用自制的无血清生产培养基（ＳＦＭ ｐ）生产ｒＨｕＥＰＯ。ＳＦＭ ｐ培养基既能维持细胞生长，又能生产ＥＰＯ，也便于纯化分离ｒＨｕＥＰＯ。使用填充床生物反应器培养细胞，能维持培养２０～２５ｄ，ｒＨｕＥＰＯ表达水平达１２～２８４ｍｇ／Ｌ之间，反应器的产率达到７１０ｍｇ／Ｌ／ｄ，比滚瓶的产率增加１２～１４倍。葡萄糖最高消耗量达到２１ｇ／Ｌ／ｄ，细胞培养密度最高达到３０×１０７／ｍｌ以上，每次可收无血清培养上清８０～８７Ｌ。由于细胞被固定在聚酯片上，培养上清中脱落细胞很少。观察了反应器的乳酸和氨的含量，其结果表明乳酸和氨含量分别低于３５ｇ／Ｌ和５ｍｍｏｌ／Ｌ，不影响产物的表达。经过多批培养和生长ｒＨｕＥＰＯ的结果表明，自行配制的ＳＦＭ ｐ培养基在该反应器能有效地维持细胞生长和生产ｒＨｕＥＰＯ。