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人突变型TRAIL体外诱导脑恶性胶质瘤细胞凋亡的研究
被引：5
作者：
关良
冯健男
王国华
阙海萍
刘少君
机构：
[1] 军事医学科学院附属医院神经外科
[2] 军事医学科学院基础医学研究所神经生物室
[3] 军事医学科学院基础医学研究所神经生物室 北京
来源：
关键词：
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体;
胶质细胞瘤;
细胞凋亡;
D O I：
暂无
中图分类号：
R739.4 [神经系肿瘤];
学科分类号：
100214 ;
摘要：
目的观察人突变型肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)体外诱导人脑胶质瘤细胞的凋亡作用。方法设计90个碱基突变的人TRAIL全长基因,分四段合成,然后拼接获得全长寡核苷酸,插入原核表达载体pGEX-2T,转化E.coliDH-5α,丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法分离、纯化融合蛋白,凝血酶切得到单纯的TRAIL蛋白。MTT法和流式细胞仪定量分析纯化产物体外对人A172、U87、U251和鼠C6脑恶性胶质瘤细胞的凋亡作用。结果突变型TRAIL原核表达产物为可溶性,体外可明显诱导人A172、U87、U251脑胶质瘤细胞凋亡,而对C6鼠胶质瘤细胞无明确的凋亡诱导作用。结论原核表达突变型TRAIL在体外具有明显诱导脑胶质瘤细胞凋亡的作用。
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