荧光定量PCR方法在沙门菌鉴定中的应用

被引：6

作者：

赵雪涛

陈军

刘志勇

机构：

[1] 上海市徐汇区疾病预防控制中心

[2] 上海市黄浦区卫生检验所

来源：

上海预防医学杂志 | 2005年 / 02期

关键词：

荧光定量聚合酶链反应; 沙门菌; 荧光标记探针;

D O I：

10.19428/j.cnki.sjpm.2005.02.007

中图分类号：

Q93-3 [微生物研究与微生物实验];

学科分类号：

摘要：

[目的 ]　用taqman技术建立沙门菌荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测方法 ,尝试快速、准确地鉴定沙门菌。　 [方法 ]　根据沙门菌GenBankAccessionNOU2 5 3 5 2基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的沙门菌基因片段克隆导入载体 ,构建的重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定。利用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)技术进行各类菌株的定性鉴定。　 [结果 ]　应用重组质粒制作的定量曲线 ,其循环阈值与模板浓度的对数值具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 .999。检测各类菌株 ,其中沙门菌 41株、H抗原丢失的沙门菌 16株均阳性 ;非沙门菌 10 9株均阴性。　 [结论 ]　建立了鉴定沙门菌的荧光定量PCR方法 ,该方法简便、快速、准确 ,有很好的应用前景和研究价值

引用

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