痰耐药结核分枝杆菌embB基因的快速检测及乙胺丁醇耐药机制研究

目的快速检测痰耐药结核分枝杆菌embB基因及了解乙胺丁醇(EMB)耐药的分子机制。方法用PCR方法直接从耐药肺结核患者痰及临床分离菌株扩增embB基因片段,对扩增获得的embB基因片段进行序列测定,比较分析全耐、对EMB敏感的耐多药、对EMB耐药的耐多药、全敏感或标准结核分枝杆菌株之间的基因序列差异。结果于6小时内从耐药肺结核痰中快速检测到embB基因。从所有临床分离菌株均扩增获得847bp片段,序列测定比较发现,全耐菌和对EMB耐药的耐多药菌株均检测有embB基因点突变,突变位点均为第306位密码子ATG突变为ACG,而全敏感株、对EMB敏感的耐多药菌株和标准菌株均未检测到基因突变。结论PCR及序列分析方法可快速、准确检测结核分枝杆菌embB基因及其突变,结核分枝杆菌对EMB的耐药性与embB基因点突变有关。