Fugene6——一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法

被引:10
作者
胡义德
高楠
曹晓运
周决
曹世龙
机构
[1] 复旦大学医学院肿瘤医院放射治疗科!上海
关键词
Fugene6; 真核细胞; 基因转染; 人p14ARF表达载体;
D O I
10.13431/j.cnki.immunol.j.20010046
中图分类号
R394.8 [医学遗传工程];
学科分类号
0831 ;
摘要
目的建立一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法。方法采用一种新的非脂质体基因转染试剂 Fu-gene 6 ,以人 p14ARF蛋白表达载体 (p CI- neo- p14ARF)为外源 DNA,转染存在 p14ARF基因原发缺失的人 H46 0 ,A5 49,U2 5 1和 PC- 3共 4个癌细胞系 ,通过 G418筛选 2 1d确定转染效率。结果经转染的 4个细胞系培养孔中均长出了抗 G418细胞克隆 ,而且这些细胞克隆的 p14ARF基因 PCR产物均为阳性 ,细胞毒性分析发现高浓度 Fugene6作用下各细胞的增殖活力未受影响。结论 Fugene 6为一简便快速、易操作、重复性好且无细胞毒性的体外真核表达载体基因转染新系统
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