塞来昔布联合5-FU抑制裸鼠结肠癌生长及其机制的探讨

目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合选择性环氧合酶-2(Cox-2)抑制剂-塞来昔布(celecoxib)对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及作用机制。方法:60只裸鼠建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后随机分为4组,分别给予塞来昔布及5-FU进行药物干预,成模28d后观察各组裸鼠实验前后的体质量变化、各组裸鼠瘤体体积、瘤质量,计算抑瘤率。Tunel方法检测凋亡指数(AI),电镜观察细胞凋亡形态,免疫组化及蛋白质印迹法检测各组细胞色素C、Caspase-3、Caspase-9以及Cox-2的表达水平。结果:各药物干预组肿瘤生长明显受抑制,塞来昔布干预组、5-FU干预组以及联合干预组抑瘤率分别为16.93%、56.16%和77.06%,P<0.01。电镜下见对照组瘤细胞无明显凋亡形态改变,而各干预组瘤细胞呈现明显凋亡形态改变,联合干预组凋亡表现尤为典型。各干预组较对照组肿瘤细胞凋亡明显增加,干预组各组之间AI比较差异有统计学意义,P<0.01。免疫组化及蛋白质印迹法显示,干预组Caspase-3、Caspase-9以及细胞色素C的表达水平明显高于对照组,且干预组各组之间比较其表达水平差异也有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹法检测结果显示,塞来昔布组及联合干预组的Cox-2表达明显低于对照组及5-FU干预组,其中联合治疗组表达水平最低。结论:塞来昔布与5-FU联合应用时具有明显的协同抗肿瘤作用,其机制可能不仅与塞来昔布具有协同抗肿瘤作用相关,还可能涉及5-FU通过基因水平的调控来进一步促进塞来昔布对Cox-2表达的抑制,进而显著上调细胞色素C、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达,最终激活细胞色素C依赖性凋亡信号通路促进肿瘤细胞凋亡。