3H-花生四烯酸参入大肠杆菌膜检测细胞内外磷脂酶A2活性

被引:4
作者
邱耕
涂植光
唐旭
机构
[1] 重庆医科大学医学检验系,重庆医科大学医学检验系,四川省人民医院检验科
关键词
花生四烯酸; 大肠杆菌; 磷脂酶A类; 细胞; 放射化学; 氚;
D O I
暂无
中图分类号
R817 [放射性同位素在医学上的应用];
学科分类号
100106 [放射医学];
摘要
目的 建立一种用同一底物检测分泌型磷脂酶A2 (sPLA2 )和胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )的放射化学方法。方法 用3 H 花生四烯酸参入大肠杆菌膜 ,在一定条件下被待测PLA2 水解 ,以水解率的大小表示酶活性的高低。结果 测定cPLA2 和sPLA2 反应体系中最适pH值分别是 7.8和 8 0 ,最适钙离子浓度是 5和 13mmol/L ;cPLA2 批内CV 5 .2 % ,批间CV 10 .9% ,sPLA2 则分别是 4.9%和 7.8% ;倍比稀释实验结果具有良好的线性关系 ;急性胆囊炎患者血清sPLA2 活性明显高于正常人 ,内毒素 (LPS)诱导前后白血病K5 62细胞内和培养液中PLA2 活性差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论建立的检测法可满足临床和科研要求
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