TLR介导BCG和猪苓多糖激活巨噬细胞株J774 NF-κB的表达

目的通过观察BCG和猪苓多糖作用后的巨噬细胞株J774免疫分子的表达,探讨猪苓多糖协同BCG启动非特异性免疫反应机制和可能的激活途径。方法应用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜,定量和定性分析体外猪苓多糖协同BCG与巨噬细胞株J774相互作用后,TLR和CD14分子的表达及NF-κB在巨噬细胞中表达的核/浆荧光强度比。结果J774细胞在BCG和猪苓多糖作用后表达TLR4,而不表达TLR2。TLR4的表达在3h出现谷值,6h达峰值,之后迅速下降,到24h48h时再缓慢上升。BCG加猪苓多糖组TLR4的表达高于BCG组（P<0.05）。CD14的表达也是6h达峰值,随后缓慢下降,BCG加猪苓多糖组作用24h观察,CD14的表达都高于BCG组（P<0.05）。NF-κB的表达细胞浆和胞核在3～6h几乎同步达到峰值,之后下降。BCG组、PPS组及BCG+PPS组细胞核/浆荧光强度比均在6h处出现谷值,而在12h处出现一个峰值,随后下降。而PPS组及BCG+PPS组在12～24h缓慢下降,同BCG组相比差异有统计学意义（P<0.05）。各实验组细胞的核/浆荧光强度比（Fc/Fn）增大,差异有统计学意义（P<0.05）。结论猪苓多糖能协同BCG,通过TLR4与CD14一起将胞外信号转导至胞内,从而使NF-κB迅速从胞浆移位到胞核,调节相应靶基因的表达。