姜黄素对缺氧再灌注时体外培养星形胶质细胞载脂蛋白E及类视黄醇X受体、肝X受体表达的影响

目的:本研究旨在观察在姜黄素(Curcumin)对离体缺血再灌注模型中,原代培养新生SD大鼠的大脑皮层星形胶质细胞载脂蛋白E(Apolipoprotein E,Apo E)、类视黄醇X受体(Retinoic X receptor,RXR)和肝X受体(Liver X receptor,LXR)的影响。方法:选取新生SD大鼠,对其大脑皮层的星形胶质细胞进行原代培养,用糖氧剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/Reoxygenation)方法来构建离体的脑缺血再灌注模型。运用免疫荧光法观察神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达来鉴定星形胶质细胞。本实验将培养的细胞分为7组:正常对照组;模型组;姜黄素剂量组:2.5umol/L,5umol/L,10umol/L,20umol/L;尼莫地平阳性对照组:0.5umol/L。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)两个指标分别对细胞的活力以及细胞的毒性进行评定。用ELISA法对原代细胞条件培养液中Apo E和RXR、LXR的含量进行测定,并用蛋白质印迹法(Western Blot)对星形胶质细胞Apo E和RXR、LXR的表达水平进行测定。结果:姜黄素可使细胞活力明显增高,LDH释放量显著降低,并使APOE及LXR、RXR的表达上调。其中20umol/L效果最为明显,而最低剂量2.5umol/L几乎为无效剂量。结论:姜黄素对糖氧剥夺再灌注条件下离体星形胶质细胞具有保护作用,此保护作用可能是通过上调APOE及LXR、RXR的表达所引起的。